SDA沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基是真菌分離與培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，廣泛應(yīng)用于臨床微生物檢驗(yàn)、藥品無(wú)菌檢查、化妝品微生物限度測(cè)試及環(huán)境真菌監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。其低pH（約5.6）環(huán)境可有效抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，同時(shí)富含葡萄糖和蛋白胨，為酵母菌、霉菌等真菌提供理想營(yíng)養(yǎng)。然而，若配制過(guò)程不規(guī)范，易導(dǎo)致pH偏差、凝固不良或污染，直接影響真菌檢出率與實(shí)驗(yàn)可靠性。掌握
SDA沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)化制備方法至關(guān)重要。
一、原料與水質(zhì)要求
培養(yǎng)基干粉：選用符合《中國(guó)藥典》或USP標(biāo)準(zhǔn)的商品化SDA干粉，避免自行配比誤差；
溶劑：必須使用純化水或去離子水（電導(dǎo)率≤5.1μS/cm），禁用自來(lái)水（含氯、礦物質(zhì)干擾真菌生長(zhǎng)）；
典型配方（每升）：葡萄糖40g、蛋白胨10g、瓊脂15–20g，pH自然約為5.6（無(wú)需額外調(diào)酸）。
二、規(guī)范配制流程
稱量：按說(shuō)明書(shū)準(zhǔn)確稱取干粉（通常49–55g/L），避免多加瓊脂導(dǎo)致過(guò)硬或葡萄糖過(guò)量抑制某些真菌；
溶解：將干粉緩慢加入水中，邊加邊攪拌，防止結(jié)塊；
加熱煮沸：置于電爐或微波爐中加熱至沸騰，持續(xù)1–2分鐘，確保瓊脂溶解、培養(yǎng)基澄清；
分裝：趁熱分裝至潔凈試管或平皿（平皿約15–20mL/90mm），避免冷凝水過(guò)多；
滅菌：121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘，嚴(yán)禁延長(zhǎng)滅菌時(shí)間，否則葡萄糖焦化變褐，影響真菌生長(zhǎng)；
冷卻凝固：滅菌后自然冷卻至約50℃再傾注平皿，室溫水平靜置凝固，避免震動(dòng)產(chǎn)生氣泡或表面不平。
三、關(guān)鍵質(zhì)量控制點(diǎn)
pH驗(yàn)證：滅菌前測(cè)pH應(yīng)為5.4–5.8，若偏高可滴加1mol/LHCl微調(diào)（一般無(wú)需調(diào)整）；
無(wú)菌檢驗(yàn)：隨機(jī)抽取3%成品于20–25℃培養(yǎng)5天，確認(rèn)無(wú)菌生長(zhǎng)；
促生長(zhǎng)試驗(yàn)：接種標(biāo)準(zhǔn)菌株（如白色念珠菌ATCC10231、黑曲霉ATCC16404），48–72小時(shí)內(nèi)應(yīng)良好生長(zhǎng)，菌落形態(tài)典型。
四、儲(chǔ)存與使用注意事項(xiàng)
避光冷藏：制備好的平板或斜面應(yīng)密封（如用封口膜）后于2–8℃保存，有效期通常≤14天；
使用前回溫：從冰箱取出后室溫平衡30分鐘，避免冷凝水稀釋表面；
禁止反復(fù)融化：已凝固的SDA不可二次加熱使用，以免營(yíng)養(yǎng)破壞。
更新時(shí)間：2025-12-02
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微生物干粉/顆粒培養(yǎng)基
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